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鳥白血病ウイルス、鶏伝染性貧血ウイルス、鳥レオウイルス、および家禽アデノウイルスを検出するための四重鎖RT-qPCRの開発

抽象的な鳥白血病ウイルス (ALV)、鶏伝染性貧血ウイルス (CIAV)、鳥レオウイルス (ARV)、および家禽アデノウイルス (FAdV) は、水平方向および垂直方向に感染し、家禽の群れに免疫抑制を引き起こす可能性がある重要なウイルス病原体です。それらは臨床現場で多様な病原性の特徴を示し、家禽の群れの健康に継続的な脅威をもたらします。ここでは、ALVのenv遺伝子、CIAVのVP1遺伝子、ARVのM1遺伝子、FAdVのORF1遺伝子に対して特異的なプライマーとプローブを設計した。 ALV、ARV の RNA 標準、CIAV、FAdV のプラスミド DNA 標準が構築されました。これら 4 つのウイルスを検出するための 4 重リアルタイム定量 PCR (RT-qPCR) を確立するために、反応条件 (プライマーとプローブの濃度、アニーリング温度、反応サイクル) が最適化され、特異性、感度、再現性が分析されました。結果は、開発されたアッセイが ALV、CIAV、ARV、および FAdV を特異的に検出でき、他のニワトリウイルスとの交差反応がないことを示しました。それらの検出限界 (LOD) はそれぞれ 136.66、129.59、133.20、および 139.79 コピー/反応であり、高い特異性と感度を示しています。さらに、このアッセイは優れた再現性を示し、変動係数 (CV) はアッセイ内で 0.29% ~ 0.93%、アッセイ間で 0.29% ~ 0.99%…

鳥白血病ウイルス、鶏伝染性貧血ウイルス、鳥レオウイルス、および家禽アデノウイルスを検出するための四重鎖RT-qPCRの開発

抽象的な

鳥白血病ウイルス (ALV)、鶏伝染性貧血ウイルス (CIAV)、鳥レオウイルス (ARV)、および家禽アデノウイルス (FAdV) は、水平方向および垂直方向に感染し、家禽の群れに免疫抑制を引き起こす可能性がある重要なウイルス病原体です。それらは臨床現場で多様な病原性の特徴を示し、家禽の群れの健康に継続的な脅威をもたらします。ここでは、ALVのenv遺伝子、CIAVのVP1遺伝子、ARVのM1遺伝子、FAdVのORF1遺伝子に対して特異的なプライマーとプローブを設計した。 ALV、ARV の RNA 標準、CIAV、FAdV のプラスミド DNA 標準が構築されました。これら 4 つのウイルスを検出するための 4 重リアルタイム定量 PCR (RT-qPCR) を確立するために、反応条件 (プライマーとプローブの濃度、アニーリング温度、反応サイクル) が最適化され、特異性、感度、再現性が分析されました。結果は、開発されたアッセイが ALV、CIAV、ARV、および FAdV を特異的に検出でき、他のニワトリウイルスとの交差反応がないことを示しました。それらの検出限界 (LOD) はそれぞれ 136.66、129.59、133.20、および 139.79 コピー/反応であり、高い特異性と感度を示しています。さらに、このアッセイは優れた再現性を示し、変動係数 (CV) はアッセイ内で 0.29% ~ 0.93%、アッセイ間で 0.29% ~ 0.99% でした。開発されたアッセイは、中国広西省の1,575の臨床サンプルをテストすることによって検証されました。 ALV、CIAV、ARV、FAdVの陽性率はそれぞれ36.89%(581/1,575)、17.65%(278/1,575)、2.16%(34/1,575)、7.05%(111/1,575)であった。これら 1,575 の臨床サンプルも、報告されている参照方法を使用して検査され、その結果が確立された方法の結果と比較されました。開発されたアッセイと参照アッセイの一致率は 99.31% を超えました。結論として、ALV、CIAV、ARV、および FAdV を効率的かつ正確に検出および区別するための四重 RT-qPCR の開発に成功しました。

#鳥白血病ウイルス鶏伝染性貧血ウイルス鳥レオウイルスおよび家禽アデノウイルスを検出するための四重鎖RTqPCRの開発

執筆者について: nipponese

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