統計分析は、GraphPad Prism 7.0 ソフトウェア (GraphPad Software Inc.、サンディエゴ、カリフォルニア州、米国) を使用した二元配置 ANOVA テストで実行されました。
4. ディスカッション
世界最大の家禽生産国である中国は、世界の鶏とアヒルの個体数のかなりの部分を占めています。この国の多様なバイオセキュリティ対策と繁殖モデルにより、養鶏場、特に生きた鳥市場（LPM）は、さまざまなAIVサブタイプの重要な保有地および遺伝子再集合のホットスポットとして機能することができます。これは、家禽内で無症状に感染する可能性がある低病原性鳥インフルエンザウイルス (LPAIV) に特に当てはまります。これらの環境は、AIV の種間感染のために、人間と AIV とが密接に接触する機会も提供します。ウーら。養鶏場から H7N9 ウイルスと H9N2 ウイルスが同時に分離され、それらの間の再集合により 5 つの遺伝子型が生成され、そのうちの 1 つがヒトへの感染の原因となったことを報告しました。 [26]。監視データはさらに、養鶏従事者における AIV 感染のかなりの血清有病率と血清発生率、および複数の AIV サブタイプ (H3N8、H5N1、H5N6、H5N8、H6N6、H7N9、および H9N2 を含む) が LPM 内で共循環していることを示しました。 [27,28,29]。この共循環により、サブタイプおよび種内およびサブタイプおよび種間での広範な遺伝子セグメントの再集合が促進されます。したがって、養鶏場および LPM における AIV の蔓延状態を理解することは、家禽における AIV 監視システムを改善し、病気を制御するために重要です。この研究では、養鶏場から分離された新規H6N8ウイルスが三重再集合体ウイルスであり、ユーラシア系統由来のHA遺伝子、北米起源のNA遺伝子、およびH9N2 AIV由来の6つの内部遺伝子を有するウイルスであることが系統解析により明らかになった。注目すべきことに、この農場の鶏からは他の AIV は分離されませんでした。養鶏場へのウイルスの侵入経路は依然として不明であり、潜在的な感染源としては農場労働者、養鶏業者、野鳥などが挙げられている。懸念されるのは、このようなウイルスが LPM に導入された場合、新しい組換えウイルスの出現のための遺伝子セグメントを提供する可能性があることです。地球上のH6N1様ウイルスは、同時に流行しているH9N2ウイルスとともに、1997年にヒトに大規模な感染を引き起こした病原性H5N1インフルエンザウイルスの発生に関与した可能性がある [30]。したがって、将来のAIVの疫学調査では、家禽個体群だけでなく、高リスクの人との接触（農場労働者、LPMなど）および関連する環境要因も包含する包括的な戦略を採用する必要がある。AIVの多様なサブタイプの中でも、H6ウイルスは、野生鳥類と国内鳥類の両方での高い蔓延と、陸家禽への定着の成功で特に注目に値する。近年、野鳥から家禽へのH6型鳥インフルエンザウイルス（AIV）の感染頻度が増加しています。 H6 AIV は、哺乳動物宿主へのそれ自体の適応を促進するだけでなく、新規再集合体 AIV の出現に遺伝物質も寄与しました。監視データによると、1972年から2013年の間に中国南部で分離されたH6ウイルスは、ヒト様受容体に対する結合親和性が徐々に増加しており、H6分離株の約34％が鳥類とヒトの両方の受容体に二重結合することができた [31,32,33]。 AIVが種の壁を越えるための重要な前提条件は、細胞受容体の利用可能性とウイルス受容体結合特異性の間の適合性であり、これは突然変異および/または再集合によって変化する可能性がある。この研究では、ニワトリにおけるこの新規三重再集合体 H6N8 ウイルスの感染力、病原性、および伝染性を評価しました。その結果、ウイルスが複数の臓器で効率的に複製され、同居しているニワトリ間で効果的に伝播することが実証され、これらの表現型形質がその特定の分子的特徴によって媒介されている可能性があることが示唆された。特に、ウイルスのノイラミニダーゼ (NA) タンパク質のストーク領域で 14-aa 欠失が確認されました。このような切断は、AIV のガリ目への適応の分子マーカーとして認識されており、ニワトリに複製、病原性、伝染性の強化などの生物学的利点を与えることが知られています。 [20,34]。さらに、研究は、H9N2 AIV に由来する内部遺伝子が、ウイルスにニワトリ間でより優れた伝染能力を与え、新型鳥インフルエンザウイルスの宿主範囲を拡大する可能性があることを実証している。最近、H3N8/2022、H7N9/2013、H10N8/2014、および H10N3/2021 ウイルスなど、環境感染 H9N2 ウイルスに由来する内部遺伝子カセットを持ついくつかの新しい人獣共通インフルエンザウイルスが出現し、ヒトに波及しました。 [35,36]。新しいH6N8ウイルスがH9N2 AIVから内部遺伝子を取得したという我々の発見は、その適応性の向上の可能性を浮き彫りにし、宿主範囲の拡大とより効率的な感染につながる可能性がある。したがって、短茎 NA と H9N2 内部遺伝子の組み合わせは、我々のニワトリ モデルで観察されたウイルスの複製と伝達の効率について、もっともらしい遺伝的根拠を示しています。ただし、全体の表現型に対する各要素の具体的な寄与については、さらなる研究が必要です。マウスでは、H6N8 ウイルスが事前の適応なしで感染し、致死性疾患を引き起こす能力を実証しました。肺と鼻甲介で効率的なウイルスの複製が観察され、その後全身に拡散しました。分子分析により、哺乳類におけるこの高い病原性の根底にある潜在的なメカニズムについての洞察が得られました。 HA タンパク質は鳥型残基 Q226 および G228 を保持していましたが、T155I、G158N、T160A、および E190V などの重要な変異が受容体結合部位で同定されており、これらは以前にヒト型受容体への結合の強化に関連付けられていました。興味深いことに、HA には 137 位 (137K) にリジンも含まれており、この残基は Ni らによって分析された H6 株の 42% で観察されました。 [37]。彼らの研究は、台湾の H6 HA のトライアド N137、V190、および S228 が 226 の疎水性残基への依存を軽減し、ウイルスにヒト受容体に対するわずかな優先性を与える可能性があることを提案しました。 [37]。しかしながら、我々の分離株における受容体適応における 137K の機能的役割については、さらなる研究が必要である。さらに、NA 茎の切断により、マウスやフェレットにおける AIV の病原性が強化されることも確認されています。 [34]。さらに、PB2-G158E、PB2-I292V、PB2-A588V、PB1-M317V、PB1-P598L、PA-A515T、M1-N30D、NS1-P42Sなど、哺乳類の適応に影響を与えることが知られている他のいくつかの変異も検出されました。まとめると、これらの発見は、適応突然変異と再集合事象の両方が、マウスにおける新規 H6N8 ウイルスの病原性の変化と宿主適応に寄与している可能性があることを示唆しました。
#新規組換えニワトリ由来H6N8亜型鳥インフルエンザウイルスがニワトリとマウスに疾患を引き起こす