研究デザイン
研究サイト
この研究は、GPHAクリニックの医療研究所で開催されました。このクリニックは、GPHA、テマ港から10分のドライブで、Temaのコミュニティ5のスタッフクォーターズから車で5分です。調査地域は、グレーターアクラ地域のテマのコミュニティ2の中心にある沿岸地帯にあります。
参加者を勉強します
研究参加者はマラリアに感染した患者でした（A. falciparum 種）） および非マラリア感染被験者。
サンプルサイズ
WHO世界マラリア統計2016によると、ガーナのマラリア患者の人口は、子供と大人を含む2014年時点で8,453,557と推定されていました。 [14]。
研究に必要なサンプルサイズは、Solvinの式に基づいて計算されました [15] 下に：
$$ { text {n}} = frac {n} {{1 + n（e^{2}）}} $$
[15] ここで、n =サンプルサイズ。
E =許容エラー（10％）。
N =推定マラリア患者集団（8,453,557）。
n = 8,453,557/（1 + 8,453,557×10％2）。
n = 100。
したがって、それぞれ100人の参加者が研究のために採用され、合計200人が募集されました。
包含および除外基準
顕微鏡に基づいたマラリア診断が確認された70歳以下の参加者と、顕微鏡検査で確認されたマラリアのないマラリア診断が研究に含まれていました。過去2週間で抗マラリア性治療を受けた参加者は、共感染（腸チフス、デング熱、HIV、結核など）を患っていたか、妊娠しているか、血行障害（鎌状赤血球疾患、白血病など）、または過去3か月間に輸血を受けた。
血液サンプルの収集と実験室分析
血液サンプル収集
マラリア研究に登録された参加者から得られた末梢静脈血サンプルは、5 mLのエチレンジアミン酢酸（EDTA）チューブに収集されました。理想的な静脈が配置され、サンプルを収集する前に、適切な部位に70％のアルコールで消毒されました。サンプルには、参加者の識別番号がラベル付けされました。
血液塗抹準備と染色
それぞれ6µlと2µlの血液を使用して、同じスライド上に2つの血液塗抹標本（厚い膜と薄膜）を調製しました。薄膜は30ºの角度で広がり、長さ40 mmの塗抹標本を形成しましたが、厚い膜は15×15 mmの面積に濃度に広がっていました。ラベル付けの後、染色する前にスライドを空気乾燥させました。リン酸緩衝液（pH 7.2）でのGiemsaの1:10希釈を10分間適用しました。薄い塗抹標本はメタノールで固定されましたが、厚い塗抹標本は、マラリア寄生虫検出のための赤血球の溶解を可能にするために固定されていませんでした。染色されたスライドを緩衝液ですすいで、風乾し、顕微鏡で調べました。 Giemsaの染色と血液塗抹標本の読み物の手順の基準が厳密に従っていました [16]。
血液塗抹標本の検査
各スライドを最初に10倍と40倍でスクリーニングして、詳細な検査のために適切なフィールドを識別し、その後、マラリア寄生虫、種、および顔料を検出するために標準化されたパターン（左上から始まる）に従って100倍のオイルイマージョン未満を調べました。少なくとも100の高出力フィールドが検査されました。この最初のスクリーニングの後に寄生虫が観察されなかった場合、厚い塗抹標本は「マラリア寄生虫が見られない」と宣言されました。寄生虫検出のために、複数の集計カウンターを使用して、同時に無性寄生虫（配偶子細胞が除外された）と白血球を数えました。カウントは、200 WBCで100以上の寄生虫が発見された場合、または500 WBCで99以下の寄生虫が観察され、それに応じて結果が記録されました。その後、種の識別を確認するために薄膜を調べ、スライドは2人の独立した顕微鏡者が同意した場合にのみ陽性と宣言されました。
血のバイオマーカー分析
全血液数（FBC）分析を実施して、赤血球（RBC）、白血球（WBC）、ヘモグロビン（HB）、血小板（PLT）、ヘマトクリット（HCT）、単球、リンパ球、エオシノフィル、esinophils、faselets valut（mcv Hemoglobin（MCH）、SysMex XS-1000を使用した平均コーパスルヘモグロビン濃度（MCHC）私 各参加者のサンプルの自動溶血分析器。内部品質管理（QA）およびスケジュールされた外部品質評価計画は、品質尺度として遵守されました。
マラリア寄生虫グレーディング
寄生虫密度は、WHO寄生虫密度式を使用して計算されました [16]。
$$ { text {parasites}}/{ text {ul}} 、{ text {of Blood}} = 、、 frac {of parasites count count} {{no。 white cells counted}} times 、実際の white blood cells/ mu l $$
標準的な顕微鏡法を使用して、血液のマイクロリットルあたりの寄生虫の数（p/µL）の寄生虫の数として、寄生虫密度が最初に定量化されました。その後、これらの連続カウントは、Saksabre et alによる研究に基づいて、解釈を簡素化し、極度の値による変動性を低下させるために、順序スコアリングシステムにグループ化されました。。 [17]。分類は次のとおりでした。
低寄生血症：
中程度の寄生血症：1,000〜9,999 p/µL。
高寄生血症：10,000〜99,999 p/µL。
重度の寄生血症：> 100,000 p/µL。
運用用語の定義
白血球減少症は、血液中の白血球の総数（WBC）の減少として定義され、通常はマイクロリットルあたり4000細胞未満 [18]。リンパ球減少症は、通常、マイクロリットルあたり1000未満のリンパ球と定義される絶対リンパ球数の減少を指します [19]。血小板減少症は、血液1マイクロリットルあたり150,000未満の血小板数として定義されています [20]。
血小板 – リンパ球比は、絶対血小板値を絶対リンパ球値で割ったものとして計算されました。 [21]好中球 – リンパ球比は、絶対好中球数を絶対リンパ球数で割ったものとして計算されました。 [22]。リンパ球 – 球球比は、絶対リンパ球数を絶対単球値で割ったものとして計算されました。 [23]。血小板一球比は、絶対血小板数を絶対単球値で割ったものとして計算されました [24]。好中球球体比は、絶対好中球数を絶対単球数で割ったものとして計算されました。 [25]。全身性炎症反応指数は、絶対好中球数と単球数/リンパ球数の産物として計算されました [26]。全身性免疫炎症指数は、血小板数×好中球/リンパ球比として計算されました [27]。全身性炎症の凝集指数は、好中球数、血小板数、単球/リンパ球の産物として計算されました [22]。
データ分析
倫理的な考慮事項
1751966995
#血液学的および炎症性バイオマーカーの変動および熱帯熱マラリア原虫マラリアとの関連ガーナの診療所での横断的な比較研究マラリアジャーナル
2025-07-08 09:17:00