胚様体形成中の培養条件を強化して、グリア関連タンパク質と神経ネットワーク活性を得ることができます。
カナダのサスカチュワン大学の研究者らは、脳オルガノイド（BO）の組成が胚様体形成時の培養条件によって決定されることを発見した。 この段階での培養条件を強化すると、90 日後にグリア関連タンパク質と神経ネットワーク活性が得られます。 この研究は、BO がヒトの脳に特異的な方法でタンパク質を主に処理し、発現することが初めて示されたものである。
ヒトの BO は 15 年以上前に初めて記載されましたが、これらの文化が模倣するヒトの脳の特徴は不明でした。 人間の脳のような細胞組成を持ち、ヒトの実質組織に似たタンパク質バンドパターンも示す BO を一貫して生成することは、BO をモデルとして検証するための重要な証拠を提供します。
責任著者で博士研究員のタイラー・J・ウェンゼル博士と精神科教授のダレル・D・ムソー博士は、高収率で生成されたBOがBOの成熟に影響を与えるかどうかを検証し、収率が高いほどこれらの培養細胞がより健康であることを示唆していると仮説を立てた彼らの成熟を助けるために。 そこで彼らは、 脳細胞 胚様体 (EB) 形成培地で生成された BO に 90 日目に存在するタイプ 5。
現在、BO に関する研究のほとんどは免疫蛍光顕微鏡法や免疫蛍光顕微鏡法などの技術に依存しています。 RNA配列決定。 ただし、さらなる分析が完了しない限り、これらはタンパク質がどのように処理されるか、またはタンパク質レベルについて正確にアドバイスするものではありません。 したがって、研究者らはイムノブロッティングを使用して初代脳組織とBOの間の細胞マーカーとシナプスマーカーを比較し、BOが人間の脳と同じ方法でタンパク質を処理するかどうかを発見することを選択した。
ヒトのタンパク質を比較すると 皮質 研究チームは、マウスのCtx組織と同様に、(Ctx)および小脳(Cb)の脳組織とヒトBOのタンパク質を比較したところ、ヒトBOのタンパク質のパターンと割合がヒトの脳組織に似ていることを発見した。 イムノブロットによると、再凝集した BO は TUBB3、TMEM119、GFAP、OLIG2 を同様のレベルで発現していました。 試験管内で 90日目。
さらに、家族性 iPSC 株がより類似したオルガノイドを産生することが示されているため、兄弟ドナー (男性 1 名と女性 1 名) の iPSC から BO が形成されました。 研究チームは、同じドナーからのBOのバッチ間のばらつきがほとんどないことを観察し、培養物はヒトやマウスの脳組織よりもタンパク質のばらつきが少ないことを示した。 特に、BO培養の最初の24時間は成熟に不可欠であることも判明した。
今後、研究者らはBOにどの細胞シグナル伝達経路が存在するかを調査する予定である。 彼らは、彼らの発見がBOを神経炎症の研究に利用できることを意味することを望んでいる。
この研究は、 細胞神経科学のフロンティア。
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#新しい脳オルガノイドはヒトの脳に特異的な方法でタンパク質を発現する
2024-05-17 14:03:14