主題と研究デザイン
この前向き症例対照研究は、2022 年 1 月から 2023 年 1 月まで実施されました。研究コホートは、IS を患っている 203 人で構成されました。これらの参加者は、イランのビールジャンドにあるビールジャンド医科大学付属ラジ病院の神経科から募集されました。この研究の倫理的承認は、ビールジャンド医科大学の倫理委員会 (IR.BUMS.REC.1402.250) から得られました。研究に参加する前に、すべての参加者から書面によるインフォームドコンセントを得た。研究プロトコルは、ヘルシンキ宣言に概説されている倫理原則に従って実施されました。症例群の包含基準は、年齢が18歳以上であり、急性の初発または再発性ISと確定診断されていることであった。除外基準は、出血性脳卒中の診断、重度の肝臓または腎臓障害の存在、既知の血小板増加症、およびインフォームドコンセントの拒否であった。 ISの診断は、患者の病歴、臨床症状、臨床検査、およびコンピュータ断層撮影および/または磁気共鳴画像法によって得られた神経画像所見の包括的な評価に基づいて確立されました。
喫煙習慣、肥満、糖尿病、高血圧、高脂血症、心臓病歴、心筋梗塞、心筋症、片頭痛や一過性脳虚血発作を含む神経学的状態などの臨床データと人口統計データが記録されました。脳卒中の重症度は、15 項目の国立衛生研究所脳卒中スケール (NIHSS) を使用して評価され、項目スコアは 0 (正常) ～ 4 (完全に障害) の範囲でしたが、一部の項目は 0 ～ 2 でスコア付けされました。 NIHSS スコアは次のように分類されます: 1 ～ 5 は軽度の脳卒中を示し、6 ～ 14 は中等度の脳卒中を示し、15 ～ 24 は重度の脳卒中を示し、25 を超えるスコアは高度な脳卒中を示します。重度の脳卒中 [17]。対照群は、研究期間中に定期健康診断に参加している個人から募集された正常血圧の参加者203名で構成されました。彼らは、年齢、性別、居住地、民族に関して症例グループと照合されました。
生化学および遺伝子型アッセイ
一晩絶食した後、静脈血サンプルを肘前静脈から生化学パラメータアッセイ用に非抗凝固剤チューブに採取し、DNA 抽出用にエチレンジアミン四酢酸を含むチューブに採取しました。総コレステロール、高密度リポタンパク質 (HDL) コレステロール、トリグリセリド、および血漿グルコース濃度は、市販の試薬を使用した酵素比色アッセイを使用して定量され、低密度リポタンパク質はフリーデワルドの式を使用して計算されました。ゲノム DNA は、標準的な NaCl 抽出手順を使用して単離されました。 DNA の質と量は、Nano-Drop 2000™ 分光光度計 (Thermo Fisher Scientific、米国) を使用して評価されました。の エース 遺伝子 I/D 多型はポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) を使用して分析されました。各 20 µL 反応には、10 µL の Taq DNA ポリメラーゼ 2x Master Mix RED (Ampliqon、デンマーク)、0.8 µL のゲノム DNA サンプル、0.4 µL (10 pmol/µL) のフォワード プライマー (5′-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3′)、0.4 µL (10 pmol/µL) のリバース プライマーが含まれていました。 (5′-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3′)、および 8.4 μL の PCR グレードの水。 DNA を水に置き換えたテンプレートなしの対照を各実験に含めました。
増幅は、以下のプロトコールを使用して、ABI Veriti サーマルサイクラー (Thermo Fisher Scientific、米国) で実行しました: 94 °C で 5 分間の初期変性、その後 94 °C で 30 秒の変性を 30 サイクル、59 °C で 45 秒のアニーリング、および 72 °C で 30 秒の伸長、最終伸長は 72 °C で 5 秒分。 PCR産物は、0.5 mg/L DNAゲル染色剤（SinaClon BioScience、イラン）を含む2％アガロースゲル（SinaClon BioScience、イラン）での電気泳動によって分離し、Uvi-Tecゲルドキュメンテーションシステム（Biorad、米国）を使用して視覚化しました。挿入 (I) 対立遺伝子は 490 bp の産物を生成し、欠失 (D) 対立遺伝子は 190 bp の断片を生成しました。遺伝子型は次のように特定されました: II (490 bp バンド)、DD (190 bp バンド)、および ID (490 bp および 190 bp バンド)。
統計分析
データは、IBM パーソナル コンピューターと SPSS ソフトウェア バージョン 22 (ニューヨーク州アーモンク: IBM Corp、2013) を使用して収集、表作成、統計分析されました。データを表示するために、パーセンテージ、平均、標準偏差などの記述統計が使用されました。遺伝子型 (DD、ID、II) および対立遺伝子 (D、I) の頻度を、症例および対照被験者の両方について計算しました。連続変数の分布が正規性の仮定を満たしていないことを考慮して、ノンパラメトリック統計検定が使用されました。カテゴリ変数は、必要に応じてカイ二乗検定またはフィッシャーの直接確率検定を使用して比較されました。さらに、Mann-Whitney U 検定は 2 つの独立したグループ間の比較に利用され、Kruskal-Wallis 検定は 3 つ以上のグループ間の比較に適用されました。さらに、ロジスティック回帰分析を実行して、独立変数と従属結果の間の関連性を調べました。あ p 0.05 未満の値は統計的に有意であるとみなされます (p
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2025-11-21 16:03:00