抽象的な
目的 本研究の目的は、動物由来成分を含まないヒト角膜保存用の臓器培養培地を作成することです。臍帯血血小板溶解液（UCB-PL）を添加した培地で臓器培養中に角膜の品質を維持する効率を評価しました。
方法 ヒト角膜は、2% UCB-PLを添加した標準器官培養培地（25 mM HEPES、2 mM L-グルタミン、ペニシリン、ストレプトマイシン、およびアムホテリシンBで緩衝化したイーグル最小必須培地）と、2% FBSを添加した標準培地で、31 °Cで28日間保存されました。内皮細胞密度（ECD）が2000個/mm2以上の角膜14個（7対）が登録されました。角膜内皮細胞の品質は、器官培養の0、7、14、21、および28日目に、ECD、生存率（トリパンブルー）、および光学顕微鏡による内皮細胞（EC）の形態によって評価されました。器官培養後、平坦にマウントした角膜の免疫染色を行い、Zonula occludens-1 (ZO-1)、(Na+/K+)-ATPase、Ki-67、およびカスパーゼ3の発現と分布を分析しました。器官培養中の代謝変化は、グルコースと乳酸の濃度によって観察されました。2つの測定ポイント間の数値変数の差は、ウィルコクソン検定でテストされました。
結果 EC の保存に関しては、両方の培地で同様の結果が得られました。ECD は両方の培地で減少しましたが、EC の形態変化と生存率は 2 つのグループ間で同程度のままで、28 日間観察されたパラメーターに有意差はありませんでした。28 日間の器官培養後、ZO-1 は EC で発現し、ジグザグ線に沿って分布し、(Na+/K+)-ATPase は両方の培地で保存された上皮膜の側面と角膜の EC で発現しました。Ki67 は上皮層で検出されましたが、内皮では検出されませんでした。カスパーゼ 3 の発現は一部の角膜上皮細胞で示されましたが、EC では検出されませんでした。器官培養中の代謝変化は、両方の試験した培地でグルコースの減少と乳酸濃度の増加を示しました。
結論 本研究では、臓器培養中のECの生物学的特性に対するFBSとUCB-PLの効果が同等であることが示されました。UCB-PLを含む培地で31℃で28日間保存したヒト角膜の品質は維持されました。これにより、UCB-PLは安全で効果的で入手しやすいFBSの代替品であり、角膜保存および眼球バンキングの分野で無血清培地で使用できる可能性があります。
#臍帯血血小板溶解液が臓器培養中のヒト角膜内皮細胞の生物学的特性に与える影響