関連論文
臍帯血液hematopoietic幹細胞の回復と拡大に対する凍結の効果
2009年
目的：廃棄物組織（臍帯血、臍帯、胎盤）に存在する細胞集団は、母親または生まれたばかりの赤ちゃんに関する医学的または倫理的禁忌なしに収集される場合があります。臍帯血造血幹細胞は、臨床移植に日常的に使用されています。ただし、移植片の低い細胞線量は、遅延または破損の故障に関連するため、治療効果を制限します。細胞用量を増加させることができ、移植前のex vivoの拡大により、臍帯血移植の有効性が潜在的に改善されました。材料と方法：12個の臍帯血サンプルが含まれていました。 CD34 +細胞数に対する-80°Cでの臍帯血貯蔵の効果（平均±標準偏差 [SD]）、細胞生存率（平均±SDパーセント）、および細胞周期の状態（静止した割合と分裂率）が推定されました。臍帯血単核細胞のex vivo培養は、貯蔵前、1週間の凍結後、2週間の凍結後に行われました。 ex vivo液体培養は、幹細胞因子、インターロイキン-3（IL-3）、およびその両方を添加した培地で実施しました。結果：拡大前のアリコートにおけるCD34 +細胞のカウントは、2週間の凍結後に凍結する前に15.00±9.96×10 6細胞から7.70±3.20×10 6細胞に減少しました（p = .024）。拡大前アリコートの細胞生存率は、凍結前の99.5％±1.0％から1週間の凍結後52.5％±27.5％（p = .013）、2週間の凍結後32.5％±9.5％に減少しました（p =。 001）。細胞の膨張の平均倍と静止細胞と分裂細胞の割合は、凍結後に大幅に変化せず、幹細胞因子、IL-3、またはその両方を伴う培養で有意差はありませんでした。結論：細胞数と生存率が低下しましたが、臍帯血造血細胞の拡大の可能性を損なうことはありませんでした。 IL-3または幹細胞因子を拡張媒体の必須成分と見なすべきであるかどうかは不確実です。
臍帯血cD34（+）幹細胞および収集から96時間まで加工され、室温で保存された他の単核細胞サブタイプは、細胞療法のための満足のいく機能を維持しています
The Voice of the Blood、2015
臍帯血（UCB）は、細胞療法の良い幹細胞源です。最近、臍帯血単核細胞（MNCS）サブタイプは、収集の96時間後まで実行可能かつ機能的であり、室温で保存されていることを実証しました。次に、凍結保存の前後に細胞の生存率と機能を分析しました。収集後24時間および96時間で20個のUCBユニットを分析し、6か月間凍結し、解凍して再評価しました。 MNCは、フローサイトメトリー、7-AADによる生存率、およびクローン原性アッセイ（CFU）によって分析されました。 96時間の貯蔵後、MNCの実質的な損失は見つかりませんでした（7.320×10（6）×6.05×10（6））。割合および生存率CD34（+）細胞、B細胞前駆体、間葉系幹細胞は影響を受けませんでした。しかし、成熟したBおよびTリンパ球、および顆粒球には大きな損失がありました。すべてのサンプルでCFUの成長が観察されました。 96時間の凍結貯蔵は、コロニー形成の相対的な損失に関連していました（中央値12％）。投稿後、この損失はmを持っていました…
CEA幹細胞生存率評価のための迅速かつ正確な方法：解凍された臍帯血更新の場合
要約臍帯血（UCB）は、造血前駆細胞の主要な供給源です。これらのセルは、将来の使用の可能性のために凍結保存できます。凍結保存された前駆細胞の生存率を評価するために、少量の細胞が解凍され、死んだ（青）細胞とライブ（白い）細胞を数えるためにトリパンブルー除外テストを受けます。従来のトリパンブルー除外テストと比較して、代替の迅速なアッセイとして、Cytotox-Glo細胞毒性キットとメーカーのプロトコルとともに、Promega Glo-Max Lumumeterを使用しました。計算された生存率の割合は2つのアッセイ間で類似していたが、96ウェルプレート全体のカウント時間はわずか30分です。 Cytotox-Gloキットは、凍結保存と解凍後の前駆細胞生存率の正確な評価のための時間節約アッセイです。
in vitroおよびin vivoで評価された極度に保存され、ex in vivo操作された臍帯血前駆細胞の造血の可能性
血、1996年
凍結保存およびex vivo操作された臍帯血（UCB）サンプルの造血の可能性をin vitroおよびin vivoで評価しました。表現型分析は、臍帯血単核細胞の約1％が表面で高レベルのCD34抗原を発現することを示しています（CD34HI）が、系統抗原のパネル（lin-）はありません。特定の系統に。 CD34HI/LIN細胞の約1％は、間質細胞培養で最大7週間、Bリンパ類および多発性骨髄性子孫を生成する原始的な造血前駆細胞です。 CD34HI/lin細胞の21パーセント（+/- 13％）もTHY-1抗原の低レベルを発現し、長期培養で測定された原始造血電位のCD34HI/lin細胞よりも3倍濃縮されていますおよび表現型分析。インターロイキン（IL）-3、IL-6、および幹細胞因子（SC …の存在下でのCD34濃縮UCB前駆細胞の1週間の液体培養物
臍帯血から回収されたCD34陽性幹細胞は、6か月の凍結保護貯蔵プロセスの後に生存可能なままです
African Journal of Cellular Pathology、2019
臍帯血は骨髄移植の代替源として使用でき、その使用は血行障害、免疫学的欠陥、および特定の遺伝性疾患を呈する患者の新しい治療分野に発展しています。ヘモグロビノパシーを含む。目的は、移植に適している可能性のあるHSCの供給源としての凍結臍帯血の生存率を評価することでした。血液検体は、30人の同意のある母親の臍帯から得られ、20°Cで凍結するためにグリセリンを含む5つの凍結液に分配されました。一方、HSCのマーカーとしてCD34を使用して免疫表現型を使用することにより、新鮮な網状サンプルで定量的アッセイを実施しました。 PARTEC Cyflow Cube 6を使用して、SYSMEX PARTECから得られた特定の蛍光/抗体で細胞を標識した後、生存細胞を測定しました。繰り返しの定量化は、1か月の間隔で5か月連続で実施され、生成された結果はT非依存性テストを使用して分析されました。 6連続カウントの平均平均誤差（SEM）は、20,798±2750、19849±2691、19223±2637、18363±2582、17052±2583および16184±2423でした。凍結保護されたサンプルをベースラインと比較したときに得られたp値は、0.806、0.681、0.521、0.325および0.213でした。後続の数がベースラインカウントとはわずかに異なることを反映しています。したがって、肝臓細胞を凍結保護剤に貯蔵し、生存率の大幅な減価を伴うことなく、最大6か月間凍結することは、リソースの貧しい設定では安全な代替品です。この代替案を調査する必要があり、さらに研究を実施する必要があります。
コロンビアの臍帯血幹細胞銀行で凍結保存された造血前駆細胞の解凍後の生存率と機能能力
Gynecology＆ObstetricsのInternational Journal、2010年
目的：Banco deCélulasSTEMde Colombiaで凍結保存された臍帯血サンプルからの造血前駆細胞の生存率と機能能力を評価する。方法：20個のサンプルを解凍して遠心分離した後、生存可能な白血球にトリパンブルー法で番号が付けられ、CD34 + CD45 +薄い造血前駆細胞にフローサイトメトリーによって番号が付けられました。クローン原性アッセイは、実行可能なCD34 + CD45 + DIM細胞の機能能力もテストしました。結果：実行可能なCD34 + CD45 + DIM細胞の中央値は、凍結する前に99.6％、解凍後73.0％でした（P
臍帯血の密度分離とhemopoietic前駆細胞の回復：臍帯血銀行への影響
幹細胞、1995年
臍帯血（CB）は、移植環境での臨床使用に適した造血幹細胞の潜在的な供給源として評価されています。以前の報告では、凍結保存以外の操作により、前駆細胞の大幅な損失を記録しています。前駆細胞の損失を最小限に抑えながら、分画および凍結除去CBサンプルの実現可能性を評価しました。前駆細胞の最高の回復を維持しながら、赤血球（RBC）の最高枯渇を得ようとする試みで、さまざまな密度勾配に基づいてさまざまな分離手順を比較しました。パーコールの3つの異なる密度（1.069 g/ml、1.077 g/ml、1.084 g/ml）、ポリゲリン（Emagel）の沈降、およびポリゲリン上の堆積と、それに続いてFicoll/hypaque（f/h）を分離しました。分離されたサンプル（n = 25）は、CD34+細胞および前駆細胞（CFU-GEMM、BFU-E、CFU-GM）の回復について分析されました。ポリゲリン上での沈降による分離とF/Hによる分離により、CD34+細胞の高い回収率（85.3±5.6％）およびCFU-GEMM、BFUの総回収率を維持しながら、RBCの最高枯渇（最終細胞懸濁液0.4±0.1％）の最高枯渇が可能になりました。 -eおよびcfu-gm。凍結保存後、クローン原性前駆細胞の回収率はCFU-GEMMで82％、BFU-Eで94％、CFU-GMで82％、コロニー形成ユニット（CFU）は5週間の長期文化（LTC）の場合は90％でした。 。さらに、雌雄異類の前駆細胞のin vitro成長と複製効率に対する幹細胞因子（SCF）の効果を評価しました。 SCFの存在により、CFU-GEMMが大幅に増加しました（14±4対49±5、P
#PDFIVF寄付プログラムの患者における将来の遺伝的および治療的使用の源泉としての臍帯血からの幹細胞