56歳の日本人男性は、シエラレオネのフリータウンで医療活動のために2か月を過ごしました。彼はマラリア予防のためにドキシサイクリンを処方されていましたが、時には用量を逃し、日本に戻ったときにそれを中止しました。彼は症状の発症の少なくとも6か月間は海外旅行をしていませんでした。帰国後2か月後、彼は翌日自発的に解決した再発した夜行性発熱を発生させました。これらのエピソードは、12〜48時間の間隔で5回再発しました。症状発症の10日目に、彼は病院に提示しました。
病院に到着すると、彼の体温は37.9°C、血圧137/72 mmHg、心拍数95 bpmでした。身体診察では、彼の眼の結膜または肝脾腫に黄undの兆候がないことが明らかになりました。血液検査では、赤血球数4.72×105/µL、ヘモグロビン13.5 g/dL、血小板数11.0×104/µl、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ34 IU/L、アラニンアミノトランスフェラーゼ64 IU/L、およびLactate dehydrogenase 311 Iu/L。低血糖、代謝性アシドーシス、腎障害、または高ビリルビン血症の証拠はありませんでした。さらに、胸 x– 異常は示されませんでした。血液培養は成長を示さなかった。
迅速な診断検査（Binaxnow Malaria; Abbott）は、非ファルシパルムマラリアを示しました。 Giemsa染色された薄血塗抹標本の顕微鏡観察により、バンド型の栄養胞子を含む寄生性赤血球を明らかにしました。 P.モーラリア0.059％（27.8×102/µL）の寄生虫症があります（図1）。
図1
Giemsa染色された薄血塗抹標本の顕微鏡画像（×1000倍率）。 a リングフォーム; b–d バンドフォーム; Eシゾント
患者は、シンプルなカルタンマラリアと診断され、3日間ArteMether – Lumefantrineで治療されました。彼は、約27時間の発熱クリアランス時間と約36時間の寄生虫クリアランス時間の後、合併症なしで排出されました。これらのクリアランス時間は、アルテメーテル – ルームファントリン治療の予想範囲内であり、好ましい治療反応を示しています。彼は退院後4か月間無症候性のままでした。
ネストされたPCRは陽性でした P.モーラリア種の識別を確認します [1,2,3]。ただし、アガロースゲル電気泳動は、二次PCRバンドを使用していることを示しました P.モーラリア– 特異的なプライマーは、ユニバーサルプライマーで得られたプライマリPCRバンドよりもかすかでした（図2）。 SSU RRNA遺伝子の配列分析により、種特異的リバースプライマーの結合部位で4塩基の欠失が明らかになりました（図3）。 シトクロムb 遺伝子シーケンスにより、100％の同一性が確認されました P.モーラリア （図4） [4]。
図2
ネストされたポリメラーゼ連鎖反応の結果（PCR）。 a プライマリPCR。レーンL：100 bp DNAラダー。レーンS、F、V、OC、M、K、およびOW：矢印は、患者の血液からのDNAテンプレートと、部分的な小さなサブユニットリボソームリボ核酸（SSU RRNA）遺伝子配列を含む陽性対照を示しています。 P. falciparumを含むマラリア原虫種 （f）、 P. Vivax （v）、 P.カーティスオーバル （OC）、 P.モーラリア （m）、 P.ノウレシ （k）、 P. Ovale Wallikeer （OW）。レーンN：ネガティブコントロール（水）; b 二次PCR。レーンL：100 bp DNAラダー。レーンS、F、V、OC、M、K、およびOW：パネルA.レーンN：水からの第1ラウンド製品と同じテンプレートを使用した第1ラウンドPCR製品。レーンN ‘：水のみのコントロール。矢印は、患者のサンプルから増幅されたPCR製品を示しています P.モーラリア– 特異的なプライマー。各種に使用されるプライマーセットは、ゲルの下に示されています
図3
小さなサブユニットリボソームリボ核酸（SSU rRNAまたは18S rRNA）（317 bp）の部分配列分析。元々設計された前方プライマー（P0.5：CTGCGTTTGAATACTACAGCATGGA）を使用して、合計372塩基ペア（BP）を増幅しました。 [1, 2]青で表示）、およびプライマリPCRのリバースプライマー（P2：gaacccaaagactttttttttcat [1, 2]）。これらのうち、317 bpがシーケンスされました。本件の18S rRNA配列は、アクセッション番号LC859598の下でDDBJ/EMBL/GenBankに堆積しました。 「患者」とラベル付けされたこのシーケンスは、の完全なSSU rRNAシーケンスと一致していました マラリア原虫モーラリア「PM SSU rRNA」（DDBJ/EMBL/GenBankアクセッション番号XR_003751927.1）とラベル付けされています。患者のDNA配列では、 P.モーラリア– ネストされたPCRで使用されている特異的リバースプライマー（赤で示されている）は、削除されていることがわかりました
図4
の部分的な配列分析 シトクロムb 遺伝子（357 bp）。 2つのプライマー（RTPCRSC2_F：TGGAGTGGATGGTGTTTTAGAおよびSC3R：ACCCTAAAGGATTTGTGCTACCを使用して増幅された400-BPフラグメントが増幅されました [4]）357 bpの読み取り可能なシーケンスを生成しました。データは、アクセッション番号LC859864の下にDDBJ/EMBL/GenBankに堆積しました。 「患者」とラベル付けされたこのシーケンスは、の完全なミトコンドリアDNA配列と整合していました マラリア原虫モーラリア「PM MIT」とラベル付けされています。 （DDBJ/EMBL/GenBankアクセッション番号LT594637.1）。患者のシーケンスは100％同一でした シトクロムb の遺伝子 P.モーラリア
1754345992
#ネストされたPCRによる増幅の減少に関連するアフリカのマラリア原虫マラリアsu #rRNA遺伝子バリアントの最初の報告熱帯医学と健康
2025-08-04 22:00:00