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2025-12-16 07:54:00
樹状突起放出部位が樹状受容体の近くに位置している可能性が高いという事実 (清景ほか、2017) アナキソニック DA 細胞は、自身にシグナルを送り、自身の活動に影響を与えることができるという機能的結果をもたらす可能性があります。我々は、OB DA ニューロンが mRNA レベルで DA 受容体を発現しないことを発見しました（図4A）、DA シグナル伝達を介して彼ら自身の活動に影響を与える可能性は低いです。しかし、GABA作動性自己誘発抑制（AEI）または自己抑制は、一般にOB糸球体周囲細胞、特にDAニューロンで報告されています（スミスとジャール、2002; マーフィーら、2005; マーハーとウェストブルック、2008; ボリソフスカら、2013）。
アナキソン性ドーパミン作動性 (DA) ニューロンは自己抑制することができます。
(あ) の Log2 正規化された式 Th、Drd1、Drd2、Drd3、Drd4、 そして Drd5 嗅球 (OB) DA 細胞の mRNA。 (B) 推定上の失調性 DA ニューロンによって発火された活動電位のトレース例 (左) とその単相位相面プロット プロファイル (右)。 Cs ベースの内部溶液による長期にわたる再分極に注目してください。 (C) ガバジンの適用前 (マゼンタ) と適用後 (グレー) に記録された自己誘発抑制 (AEI) 反応の痕跡の例。減算は、オレンジ色の差し込みトレースに示されています。 (D) パッチされたDA細胞から放出されるドーパミンによって活性化される隣接するGABA作動性ニューロンのAEI応答への潜在的な関与を示す概略図。 (E) D1 様および D2 様受容体遮断薬 (SR 95531 臭化水素酸塩およびスルピリド、それぞれ 10 µM) を適用する前 (紫色) と適用後 (緑色) の AEI 応答のトレースの例。 (F）ドーパミン受容体拮抗薬を適用する前（紫）と適用後（緑）のAEI充電。 N=4 匹のマウスからの n=6 個の細胞。対応のある t 検定、p=0.21、ns= 有意差なし。 (G) ギャップ結合を介して活性化される隣接する GABA 作動性ニューロンの AEI 応答への潜在的な関与を示す概略図。 (H) 100 µM のギャップ結合ブロッカー カルベノキソロンの存在下での AEI 応答のトレースの例。 (私) 100 μM のカルベノキソロン存在下での AEI 電荷。各ドットは 1 つのセルを示します。線は平均±SEMを示す。 N=4 匹のマウスからの n=9 細胞。 (J) パッチされた細胞から放出されたGABAの脱分極によって活性化される隣接するGABA作動性ニューロンのAEI応答への潜在的な関与を示す概略図。 (K) 20 µM の NKCC1 ブロッカー ブメタニドの存在下での AEI 応答のトレースの例。 (L) 20 μM のブメタニド存在下での AEI 電荷。すべての規約は次のようになります F; N=3 匹のマウスからの n=5 細胞。
DA ニューロンのアナキソニック サブタイプが自己抑制できるかどうかに対処するために、DAT-tdT マウス系統を使用して、DA ニューロンを特異的にターゲットにしました (バックマンら、2006; マディセンら、2009; ガリアーノら、2018; バーン他、2022;材料と方法を参照)、AEI 応答を誘発するために tdT+ 細胞で全細胞パッチ クランプ記録を実行しました。我々は、特徴的な「単相」位相面プロット プロファイルによってアナキソニック DA 集団を特定しました (図4B; ガリアーノら、2018）。一過性の脱分極を伴う伝達物質の放出を引き起こした後、GABA-A 受容体拮抗薬ガバジンを 10 μM で添加することによって遮断された、長期にわたる内向き電流が観察されました (図4C; AEI 電荷: 44.11 ± 6.02 pC; N=18 匹のマウスからの n=31 細胞）。これらのデータは、アナキソン性 DA ニューロンが AEI 応答を示すことを明らかにしており、これはこれらの細胞の樹状突起におけるシナプス前放出部位とシナプス後標的の共存と一致しています。
AEI 応答は、記録されたアナキソン DA ニューロンの脱分極によって開始されますが、その応答は同じ細胞から放出された GABA の直接の結果であると常に想定されてきましたが、実証されていませんでした。しかし、局所糸球体回路には他の GABA 作動性細胞が存在することを考えると (清景ほか、2017;レビューのために参照してください トゥフォ他、2022）、DA ニューロンの脱分極によって同じ細胞内で GABA 応答が生じる可能性のある間接的な方法は他にもあります。
OB の DA ニューロンは GABA とドーパミンを放出します (ボリソフスカら、2013)、D1 様および D2 様ドーパミン受容体は糸球体層で発現されます (コロナスら、1997）。したがって、神経伝達物質の放出を引き起こすためにアナキソン性 DA ニューロンを脱分極すると、GABA と同時に放出されたドーパミンが隣接するニューロンのドーパミン受容体を活性化し、二次的な GABA 放出を引き起こし、記録された細胞で AEI 応答を駆動する可能性があります (図4D）。この可能性を排除するために、電荷の減少に向けた有意でない傾向にもかかわらず、D1 様および D2 様受容体アンタゴニスト (それぞれ 10 μM SKF 83566-臭化水素酸塩および 10 μM スルピリド; 図 4E および F;ブロッカー前の AEI 電荷: 25.93 ± 4.99 pC、ブロッカー後の電荷: 17.37 ± 3.47 pC。 N=4 匹のマウスからの n=6 個の細胞。対応のある t 検定、p=0.21)。また、ドーパミン受容体拮抗薬の適用後のAEI減衰動態の有意な変化は見られませんでした（図4—図補足1;ブロッカー前の減衰定数k:0.03±0.003ms-1;ブロッカー後のk:0.03±0.006ms-1;N=4マウスからのn=6細胞;Wilcoxonマッチドペア検定、p=0.84）。これらの結果は、AEI 応答が他のニューロンを介して作用するドーパミンによって媒介されないことを示しています。
糸球体ニューロンはギャップ結合（ショッパとウェストブルック、2002; 小坂ほか、2005; バナジーほか、2015）。隣接する GABA 放出ニューロンの電気的活性化が AEI 応答を媒介している可能性を排除するため (図4G）、ギャップ結合が 100 μM カルベノキソロンで薬理学的にブロックされた後も AEI が依然として存在することを示しました（図 4H と I;ブロッカー後の AEI 電荷: 16.27 ± 3.83 pC; N=4 匹のマウスからの n=9 細胞）。
最後に、隣接する GABA 放出ニューロンの活性化のもう 1 つの原因は GABA 自体である可能性があります。GABA は糸球体層ニューロンに脱分極効果をもたらす可能性があります (他、2015）。記録されたニューロンによって放出された GABA が、隣接する GABA 放出細胞を活性化していないことを示すため (図4J)、20 µM で使用した Na-K-Cl 共輸送体 1 (NKCC1) ブメタニドの存在下で脱分極 GABA 応答が防止された場合、強力な AEI 応答を記録しました (図4KとL;ブロッカー後の AEI チャージ: 32.86 ± 13.66; N=3 匹のマウスからの n=5 細胞）。まとめると、これらのデータは、アナキソン性 DA ニューロンにおける AEI 応答が真の自己抑制を示していることを確実に示しています。
#ドーパミン作動性サブクラスにおける著しく異なる神経伝達物質放出戦略