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実験室で進化したCRISPR関連トランスポサゼは、ヒト細胞に適応します

CRISPR関連のトランスポサゼ（CAST）は、二本鎖切断を行わずに大きなDNA貨物を挿入できるため、ゲノム編集アプリケーションの魅力的な候補です。ただし、CASTシステムは、ヒト細胞での活性が限られていることを示しています。で公開された論文で 科学、Witte et al。ファージ支援の連続進化（PACE）を適用して、新しい鋳造バリアントの急速な進化を指示し、ヒト細胞に遺伝子サイズの貨物を効率的に統合できる鋳造システムを獲得します。Paceの反復ラウンドは、進化したTNSB（キャスト転置機構の場合のタイプの成分）を生成し、HEK細胞の統合効率を野生型よりも200倍以上高くしました。進化したTNSBには、複数のドメインにまたがる10の活動向上変異が含まれており、TNSBのパフォーマンスを改善するために多様な機能を最適化し、合理的なタンパク質エンジニアリングを通じてそのようなバリアントを取得することはほとんどありませんでした。特に、進化したTNSBは、キャストの編集効率を高めるために以前に使用されていた細胞毒性因子であるアクセサリータンパク質CLPXの補充を必要としませんでした。 #実験室で進化したCRISPR関連トランスポサゼはヒト細胞に適応します